イオン交換カラム
BioPro IEXカラム

製品の特長

短時間で良好な分離～ヒト化モノクローナル抗体の分離～

BioPro IEX SFと市販カラムについて、pH5.6での同一グラジエント条件でヒト化モノクローナル抗体分離を比較しています。BioPro IEX SFは市販カラムに比べて短時間で分析でき、ピークもシャープで分離も良好です。

Eluent	A) 20 mM MES-NaOH (pH 5.6) B) 20 mM MES-NaOH (pH 5.6)　 containing 0.2 M NaCl
Initial gradient conc.	35%B (70 mM NaCl）
Gradient slope	0.25%B/min (0.5 mM NaCl)
Flow rate	180 cm/hr (0.5 mL/min for 100 X 4.6 mmI.D., 0.378 mL/min for 250 X 4.0 mmI.D.)
Temperature	30℃
Detection	UV at 280 nm
Injection	10 μL
Sample	Humanized monoclonal IgG1 (1 mg/mL)

BioPro IEX SFのロット間再現性を示しています。どの充填剤ロットでも高い分離能を有し、優れた再現性が得られています。高いロット間再現性によりバイオ医薬品の品質管理にも最適です。

Column	BioPro IEX SF 5 μm, 100 X 4.6 mmI.D.
Eluent	A) 20 mM NaH₂PO₄-Na₂HPO₄ (pH 6.5) B) 20 mM NaH₂PO₄-Na₂HPO₄ (pH 6.5) containing 0.2 M NaCl 0-50%B (0.5-30 min)
Flow rate	0.5 mL/min (180 cm/hr)
Temperature	25℃
Detection	UV at 215 nm
Injection	10 μL
Sample	monoclonal antibody (IgG1)

ノンポーラスとポーラスカラムでタンパク質の分離を比較しています。BioPro IEXカラムノンポーラスタイプは、基材の機械的強度に優れ、カラム効率が高いため、流速をあげた高速分析に適しています。

Eluent	A) 20 mM KH₂PO₄-K₂HPO₄ (pH 6.8) B) 20 mM KH₂PO₄-K₂HPO₄ (pH 6.8) containing 0.5 M NaCl 0-100%B (0-4 min) for BioPro IEX SF 0-100%B (0-60 min) for BioPro IEX SP
Temperature	25℃
Detection	UV at 220 nm
Injection	20 μL

BioPro IEXカラムポーラスタイプは、非特異的吸着が極めて小さい親水性ポリマーを基材としたイオン交換カラムで、タンパク質と相互作用しやすい表面構造を有しています。このためタンパク質に対して高い動的吸着容量および回収率を示します。

BSAの動的吸着容量および回収率

	Dynamic binding capacity (mg/mL-resin, 10% breakthrough)	Eluted amount (mg/mL-resin)	Recovery* (%)
BioPro IEX QA	126	120	95
A社 (porous Q type)	73	58	79
B社 (porous Q type)	100	35	35

*Recovery: (Eluted amount/Dynamic binding capacity) X 100

Breakthrough curves（破過曲線）

Column	BioPro IEX QA 50 X 4.6 mmI.D. A社 (porous Q Type) 50 X 4.6 mmI.D. B社 (porous Q Type) 50 X 5.0 mmI.D.
Linear velocity	180 cm/hr
Sample	1 mg/mL Bovine serum albumin (BSA) in equilibration buffer
Equilibration buffer	20 mM Tris-HCl (pH 8.6)
Elution buffer	20 mM Tris-HCl (pH 8.6) containing 1.0 M NaCl
Detection	UV at 280 nm

市販のカラムでは負荷量が少ない場合でもピーク形状が悪く分離不十分ですが、BioPro IEX QAはサンプルの負荷量を上げても良好なピーク形状を示します。このためトータル負荷量を上げてマイナーピークまで検出したい場合や、小スケールの精製を行う場合にも有効です。

大量負荷における分離能

Eluent	A) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) B) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) containing 0.5 M NaCl 10-80%B (0-30 min)
Flow rate	0.5 mL/min
Temperature	25℃
Detection	UV at 280 nm
Injection	100 μL